Rolul ficatului în metabolismul pigmentului. Caracteristici ale metabolismului pigmentului în icter

Schimb de energie. Caracteristicile principalelor indicatori ai metabolismului energetic, semnificația lor fiziologică. BX.

Bilirubina se formează atunci când celulele roșii vechi din sânge se descompun
Sistemul reticuloendotelial. Eliberat de
hemoglobina descompune hemul. Fierul este reciclat, iar din
inel tetrapirolic printr-un complex de oxidare complexă-
reacțiile de reducere produc bilirubină. Alții
sursele sunt mioglobina, citocromii. Acest proces are loc în
Celulele RES, în principal în ficat, splină, măduvă osoasă, care
eliberare în sânge bilirubină liberă sau indirectă, insolubilă în
apă. Aproximativ 1% din celulele roșii din sânge se dezintegrează pe zi și se formează 100-250
mg de bilirubină, 5-20% din aceasta este formată din imature, premature
celule roșii din sânge distruse.Acesta este așa-numitul timpuriu (shunt)
bilirubina.

În mod semnificativ, de la 30 la 80%, proporția bilirubinei precoce crește
pentru boli si leziuni cu eritropoieza ineficienta. Acest
otrăvire cu plumb, anemie cu deficit de fier, anemie pernicioasă,
talasemie, porfirie eritropoetică, anemie sideroblastică.

În aceste boli există o excreție crescută a urobilinei
cu fecale, datorita cresterii rotatiei totale a pigmentilor biliari, fara
scurtarea duratei de viață a eritrocitelor din sângele periferic. De asemenea, devreme
bilirubina este formată din hem non-eritrocitar, a cărui sursă este
servește, proteinele hepatice (mioglobină, catalază, triptofan pirolază

ficat). Bilirubina directă este transportată legată de albumină
formă.

Schimb de bilirubină,În schimbul de bilirubină, ficatul efectuează 3
funcții: captarea (clearance-ul) sinusoidului bilirubinei din sânge de către hepatocite;
legarea bilirubinei de acidul glucuronic (conjugare); alocare
a legat (direct) bilirubina de la celula hepatică la celulele biliare
capilare (excreție).

Orez. 7. Schema transportului bilirubinei
în celula hepatică.

A - globule roșii distruse; B -
bilirubina precoce; B - gratuit (indirect)
bilirubina. 1 - sinusoid; 2 - netedă
reticul endoplasmatic; 3 - miez; 4 -
complex lamelar; 5 - canalicul biliar;
6 ~ intestin; 7 - proteine citoplasmatice.

Bilirubină indirectă (liberă).
(Fig. 7) este separat de albumină în
Membrană citoplasmatică, intracelulară
proteinele (V și Z) captează bilirubina.

Membrana hepatică este implicată activ în
captarea bilirubinei din plasmă. Apoi bilirubina indirectă în celulă
transportat la membranele reticulului endoplasmatic neted, unde bilirubina
se leagă de acidul glucuronic. Catalizatorul acestei reacții este
enzimă specifică bilirubinei uridil difosfat (UDP) -
glucuronil transferaza. Combinație de bilirubină cu acid glucuronic
îl face solubil în apă, ceea ce îi asigură trecerea în bilă,
filtrare în rinichi și reacție rapidă (directă) cu diazoreactiv,
motiv pentru care se numește bilirubină directă (legată).

Transportul bilirubinei. Eliberarea bilirubinei în bilă este
etapa finală a metabolismului bilirubinei în hepatocite. Ficat zilnic
eliberează până la 300 mg de bilirubină și este capabil să reducă pigmentul de 10 ori

mai mult decât se formează, adică. în mod normal există semnificative
rezerva functionala pentru excretia bilirubinei. La netulburat
legarea, trecerea bilirubinei de la ficat la bilă depinde de viteza
secretia biliara. Trece în bilă la polul biliar al hepatocitei cu
folosind membrane citoplasmatice, lizozomi și lamelare
complex. Bilirubina legată în bilă formează macromoleculare
soluție coloidală complexă (micele) cu colesterol, fosfolipide
și săruri biliare. CU bila trece bilirubina în subțire
intestine. Bacteriile intestinale îl refac să se formeze
urobilinogen incolor. Din partea intestinului subțire a urobilinogenului
absorbit și intră în vena portă și revine în ficat
(circulația enterohepatică a urobilinogenului).Pigment în ficat
se desparte complet.

Ficatul nu o absoarbe complet și o cantitate mică
urobilinogenul intră în circulația sistemică și este excretat prin urină.
Majoritatea rezultatelor V intestin, urobilinogenul este oxidat în
rect la pigmentul maro urobilin, care este excretat
cu fecale.

Schimb de pigment

Metabolismul pigmentului se referă, de obicei, la toate procesele de formare, transformare și degradare a pigmentului din sânge (hemoglobina), mai precis, partea sa pigmentară neproteică și principalul derivat al acestui pigment, pigmentul biliar (bilirubina). În prezent, însă, se cunosc și alți pigmenți care, conform chimiei Compoziția este aparent similară cu Hb - acestea sunt Hb musculare, citocromi, enzima respiratorie Warburg și alți pigmenți încă foarte puțin studiati. Nu este încă posibilă separarea proceselor de formare, transformare și degradare a acestor pigmenți de procesele de schimb de Hb. Într-un sens mai larg, sub P..o. putem însemna procesele de formare, transformare și degradare a tuturor pigmenților din organism, adică atât pigmenții de mai sus, grupul Hb, cât și toți ceilalți pigmenți - melanina, lipocromii etc.

FIZIOLOGIA METABOLISMULUI BILIRUBINEI

Procesul de transformare a bilirubinei libere (indirecte), formată în timpul distrugerii celulelor roșii din sânge și al defalcării hemoglobinei în organele sistemului reticuloendotelial (RES), în bilirubină-diglucuronid (legat sau direct bilirubină) în celula hepatică ( Fig. 1) se realizează în trei etape (indicate în figură cu cifre romane):

Orez. 1. Procese de neutralizare a bilirubinei libere (indirecte) și a mezobilinogenului (urobilinogenului) în celula hepatică.

Bn - bilirubină liberă (indirectă); B-G - bilirubină-glucuronid (bilirubină legată sau directă); Mbg - mezobilinogen (urobilinogen).

Cifrele romane indică etapele neutralizării

1. Stadiul I - captarea bilirubinei (B) de către celula hepatică după eliberarea albuminei;

2. Etapa II - formarea unui complex solubil în apă bilirubină-diglucuronid (B-D);

3. Etapa III - eliberarea bilirubinei (B-G) legate (directă) rezultată din celula hepatică în canaliculele biliare (ducte).

Metabolizarea ulterioară a bilirubinei este asociată cu intrarea acesteia în căile biliare și intestine. În părțile inferioare ale tractului biliar și intestinelor, sub influența florei microbiene, are loc o restabilire treptată a bilirubinei legate de urobilinogen. O parte din urobilinogen (mezobilinogen) este absorbită în intestin și prin sistemul venei porte intră din nou în ficat, unde în mod normal este aproape complet distrus (vezi Fig. 1). O altă parte a urobilinogenului (stercobilinogenul) este absorbită în sânge în venele hemoroidale, pătrunzând în fluxul sanguin general și excretată de rinichi în urină în cantități mici sub formă de urobilină, care adesea nu este detectată prin metodele clinice de laborator. În cele din urmă, a treia parte a urobilinogenului este transformată în stercobilină și excretată în fecale, determinând culoarea sa caracteristică maro închis.

Metode de determinare a bilirubinei și a metaboliților săi

Determinarea bilirubinei în serul sanguin

În practica clinică, se folosesc diverse metode de determinare a bilirubinei și a fracțiilor sale în serul sanguin.

Cel mai comun dintre acestea este biochimic Metoda Jendrassik-Grof. Se bazează pe interacțiunea bilirubinei cu acidul sulfanilic diazotizat pentru a forma azopigmenti. În acest caz, bilirubina legată (bilirubină-glucuronid) dă o reacție rapidă („directă”) cu reactivul diazo, în timp ce reacția bilirubinei libere (nelegată la glucuronid) decurge mult mai lent. Pentru a o accelera, se folosesc diverse substanțe acceleratoare, de exemplu cofeina (metoda Jendrassik-Cleghorn-Grof), care eliberează bilirubina din complexele proteice (o reacție „indirectă”). Ca rezultat al interacțiunii cu acidul sulfanilic diazotizat, bilirubina formează compuși colorați. Măsurătorile se efectuează cu ajutorul unui fotometru.

PROGRESUL DE DETERMINARE

Reactivii sunt introduși în 3 eprubete (2 probe experimentale și un martor) așa cum este indicat în tabel. Diazoreacția

Pentru a determina bilirubina legată, măsurarea se efectuează la 5-10 minute după adăugarea amestecului de diazo, deoarece în timpul repausului prelungit, bilirubina nelegată reacționează. Pentru a determina bilirubina totală, proba de dezvoltare a culorii este lăsată să stea timp de 20 de minute, după care se măsoară pe un fotometru. Culoarea nu se schimbă la continuarea stării în picioare. Măsurarea se efectuează la o lungime de undă de 500-560 nm (filtru verde) într-o cuvă cu o grosime a stratului de 0,5 cm împotriva apei. Proba martor se scade din valorile obținute prin măsurarea bilirubinei totale și conjugate. Calculul se face conform programului de calibrare. Se determină conținutul de bilirubină totală și legată. Metoda lui Jendrassik, Cleghorn și Grof este simplă, convenabilă în practică, nu implică utilizarea de reactivi puțini și este cea mai acceptabilă pentru laboratoarele practice imediat după prelevare pentru a evita oxidarea bilirubinei la lumină. Hemoliza serică reduce cantitatea de bilirubină proporțional cu prezența hemoglobinei. Prin urmare, serul sanguin nu trebuie hemolizat.

O serie de substanțe - hidrocortizon, androgeni, eritromicină, glucocorticoizi, fenobarbital, acid ascorbic - provoacă interferențe.

Construirea graficului de calibrare folosind metoda Jendrassik.

Metoda I - Shelonga-Vendes folosind proprietățile stabilizatoare ale proteinei din serul din sânge. Soluție stoc de bilirubină: într-un balon de 50 ml, se dizolvă 40 mg de bilirubină în 30-35 ml de soluție de carbonat de sodiu Na 2 CO 3 0,1 mol/l. Agitați bine, evitând formarea de bule. Se ajustează la 50 ml cu soluție de Na2CO3 0,1 mol/l și se agită de mai multe ori. Soluția este stabilă doar timp de 10 minute de la începutul preparării. Ulterior, bilirubina este oxidată. Soluție de lucru bilirubină: la 13,9 ml de ser proaspăt nehemolizat al unei persoane sănătoase se adaugă 2 ml de soluție stoc de bilirubină proaspăt preparată și 0,1 ml de soluție de acid acetic 4 mol/l. Amesteca bine. Acest lucru eliberează bule de dioxid de carbon. Soluția de lucru este stabilă timp de câteva zile. Această soluție conține exact 100 mg/L, sau 171 µmol/L, mai multă bilirubină decât serul luat pentru prepararea soluției. Pentru a exclude din calcule cantitatea de bilirubină conținută în acest ser, atunci când se măsoară pe un fotometru, valorile de extincție ale diluțiilor corespunzătoare ale lichidului de compensare sunt scăzute din valorile de extincție ale probelor de calibrare. Pentru a pregăti lichidul de compensare, se amestecă 13,9 ml din același ser care a fost utilizat pentru prepararea soluției de calibrare a bilirubinei, 2 ml dintr-o soluție de carbonat de sodiu 0,1 mol/L și 0,1 ml dintr-o soluție de acid acetic 4 mol/L. Pentru a construi o curbă de calibrare, se prepară o serie de diluții cu conținut diferit de bilirubină. La diluțiile rezultate se adaugă 1,75 ml de reactiv de cafeină și 0,25 ml de amestec diazoic. Dacă apare tulbureală, puteți adăuga 3 picături dintr-o soluție de hidroxid de sodiu 30%. Măsurarea se efectuează în aceleași condiții ca la probele experimentale, după 20 de minute. Din lichidul de compensare se prepară diluții similare cu cele de calibrare (așa cum este indicat mai jos), apoi sunt procesate în același mod ca probele de calibrare.

Masa. Determinarea bilirubinei legate

· A doua metodă este de a construi un grafic de calibrare utilizând un set gata preparat de reactivi (De exemplu, setul de bilirubină este un standard de la Lachem, care include bilirubină liofilizată (concentrația exactă de bilirubină este afișată pe eticheta flaconului); și albumină liofilizată.)

Determinarea bilirubinei în serul sanguin prin metoda fotometrică directă

Determinarea bilirubinei totale prin metoda fotometrică directă este extrem de simplă, convenabilă, nu necesită puncție venoasă (se examinează sângele capilar) și poate fi repetată de mai multe ori în timpul zilei. Dezavantajul metodei este incapacitatea de a determina fracțiile bilirubinei, mai puțină acuratețe în cazurile de hemoliză severă.

În ciuda faptului că se determină doar bilirubina totală, această abordare prezintă un interes semnificativ în neonatologie, deoarece la nou-născuți predomină un derivat al bilirubinei, aproape egal cu concentrația bilirubinei totale. Bilirubina este un pigment cu o culoare galbenă pronunțată. Curba sa de absorbție spectrală are un maxim la o lungime de undă de 460 nm (regiunea albastră a spectrului). Măsurând absorbanța la această lungime de undă ar fi posibilă determinarea concentrației bilirubinei totale din sânge. Cu toate acestea, o serie de factori complică o astfel de măsurare. Bilirubina este un absorbant puternic și, prin urmare, densitatea optimă pentru construirea unui fotometru cu o densitate optică de 0,3-0,5 B se realizează într-o cuvă cu o lungime a căii optice de aproximativ 250 micrometri (0,25 mm).

Nu este ușor să faci o astfel de cuvă. În plus, fotometria sângelui în mod direct este complicată de prezența celulelor sanguine, de împrăștierea luminii pe acestea, precum și de interferența bilirubinei cu hemoglobina, care absoarbe parțial lumina în regiunea albastră a spectrului. Prin urmare, pentru fotometrie este necesar, în primul rând, să se obțină probe de plasmă de sânge și, în al doilea rând, este necesar să se excludă influența hemoglobinei, care este prezentă în cantități mici în plasmă. Plasma pentru fotometrie se obtine in centrifuge de laborator in capilare cu hematocrit heparinizat.

METABOLISMUL PIGMENTULUI(lat. Vopsea pigmentum) - un set de procese de formare, transformare și degradare în corpul pigmenților (compuși colorați care îndeplinesc o varietate de funcții). Încălcarea P. o. este cauza unui număr mare de boli, inclusiv boli de depozitare, sau o consecință a anumitor boli (de exemplu, hepatita virală etc.).

Cel mai important aspect al metabolismului pigmentului (vezi) la animale și la oameni este schimbul de hemoglobină cromoproteică care conține hem (vezi) și pigmenții înrudiți - mioglobină (vezi), citocromi (vezi), catalaza (vezi) și peroxidaze (vezi) , mulți pigmenți respiratori (vezi). Sinteza hemului se realizează din succinil-CoA și glicină prin stadiul de formare a acidului 6-aminolevulinic, din condensarea a două molecule care produce porfobilinogen, precursorul imediat al protoporfirinei (vezi Porfirine). După terminarea ciclului porfirinei, are loc includerea unui atom de fier în porfirie, eliberat de proteina de transport feritina (vezi), cu formarea protohemului, care, combinându-se cu o proteină specifică, este transformat în hemoglobină sau alt conținut de hem. pigment. Cromoproteinele alimentelor (hemoglobina, mioglobina, proteinele clorofilei etc.), care intră în tractul gastrointestinal. tractului, sunt împărțite într-o parte proteică, care suferă apoi clivaj proteolitic și un grup protetic. Hema nu este utilizată pentru resinteza cromoproteinelor și se oxidează în hematină, care este excretată în fecale neschimbată sau sub formă de compuși formați din hematine sub influența microflorei intestinale. În țesuturi, descompunerea hemoglobinei și a altor pigmenți care conțin hem are loc într-un mod diferit. Hemoglobina, formată în timpul descompunerii globulelor roșii, este eliberată de proteina plasmatică haptoglobină (vezi) în celulele sistemului reticuloendotelial, unde, după oxidarea hemoglobinei cu formarea verdohemoglobinei, partea proteică este scindată din pigment. moleculă, care este apoi distrusă sub acțiunea enzimelor proteolitice, și eliberarea de fier, care completează rezerva generală de fier din organism.

Formarea excesivă a pigmentului galben-maroniu hemosiderine, un produs al metabolismului hemoglobinei, și depunerea acestuia în țesuturi duce la hemosideroză (vezi) și hemocromatoză (vezi). Încălcarea metabolismului hemoglobinei în ficat duce la hepatoză pigmentară (vezi Hepatoză). Cu distrugerea intensivă a unui număr mare de globule roșii (de exemplu, în timpul otrăvirii, infecțiilor, arsurilor), apare hemoglobinuria (vezi) - apariția unei cantități semnificative de hemoglobină în urină. Există numeroase cazuri de sinteza a hemoglobinei anormale, care constă, de exemplu, în înlocuirea aminoacizilor din structura primară a globinei - proteina moleculei de hemoglobină (vezi Anemia; Hemoglobina, hemoglobinele instabile; Hemoglobinopatii). În unele patologii, afecțiuni la oameni și animale, există o eliberare din mușchi și excreție a mioglobinei în urină (vezi Mioglobinurie).

Verdohemoglobina produce pigmentul verde biliar biliverdin, care este un derivat liniar al tetrapirolului. Se găsește în bilă, precum și în țesuturile animale și umane. Când biliverdina este restabilită, se formează un alt pigment biliar galben-roșcat, bilirubina (vezi). Pigmenții biliari care intră în intestine cu bilă sunt absorbiți parțial în sânge și intră în ficat prin sistemul venei porte (vezi Pigmenții biliari). Bilirubina liberă (indirectă) este slab solubilă și toxică; este neutralizat în ficat prin formarea diglucuronidei solubile - un compus pereche de bilirubină cu acid glucuronic (bilirubină directă). În tractul digestiv, când bilirubina este restabilită, se formează pigmenții principali ai fecalelor și urinei - urobilinogen și stercobilinogen, care sunt oxidați în aer în stercobilină (vezi) și urobilină (vezi). Nivelul normal al bilirubinei indirecte din sânge este de 0,2-0,8 mg/100 ml. Când conținutul de bilirubină din sânge crește peste 2 mg/100 ml, se dezvoltă icter (vezi). În caz de icter, bilirubina directă trece în urină prin filtrul renal (vezi Bilirubinurie). Când funcția hepatică este afectată, uneori se găsesc cantități mari de urobilină în urină (vezi Urobilinurie). Încălcarea metabolismului porfirinei duce la dezvoltarea bolilor aparținând grupului de porfirie (vezi). Cu porfirinurie, care însoțește o serie de boli, se observă o excreție crescută a porfirinelor în urină.

În unele patoli, afecțiuni (de exemplu, cu E-hipovitaminoza), precum și cu îmbătrânirea, pigmentul lipidic lipofuscina se acumulează în țesuturile nervoase, musculare și conjunctive (vezi). La animale, sub influența radiațiilor ionizante și a tumorilor maligne, a fost detectată formarea excesivă de pigmenți de natură lipidică, care aparent apar ca urmare a autooxidării lipidelor nesaturate și a polimerizării ulterioare a produselor lor de oxidare.

Un organism animal nu este capabil să sintetizeze o serie de pigmenți găsiți în plante. Cu toate acestea, biosinteza clorofilei (vezi) în țesuturile plantelor are caracteristici comune cu formarea de porfirine la animale. Carotenoizii (vezi) sunt sintetizați prin condensarea secvenţială a moleculelor de acetil-CoA prin formarea acidului mevalonic. Când carotenii sunt oxidați, se formează xantofile. Carotenoizii care intră în organismul animalelor cu alimente vegetale suferă descompunere oxidativă (acest proces are loc în principal în peretele intestinal) cu formarea retinei, o aldehidă a vitaminei A. Vitamina A, care se formează apoi, intră în sânge și se acumulează în diverse tesuturi, inclusiv .in ficat. În fotoreceptorii retinei, retina, combinându-se cu proteina opsina, formează rodopsina (vezi), care asigură discriminarea luminii (vezi Pigmenți vizuali).

Dacă conversia carotenoizilor în vitamina A este afectată, se dezvoltă hipovitaminoza A, însoțită de modificări semnificative ale epiteliului, leziuni oculare etc. Forma exogenă a deficienței de vitamina A este rară (vezi Deficiența vitaminei). Excesul de caroten în corpul uman duce la carotenemie (vezi).

Flavonoidele și antocianidinele (vezi Flavone, Antocianine) din organismul vegetal sunt sintetizate din acidul shikimic sau prin condensarea a două molecule de malonil-CoA cu o moleculă de acetil-CoA. În corpul uman, flavonoidele alimentare se descompun în fragmente mai mici; uneori, produșii de descompunere ai flavonoidelor se găsesc în urină în compoziția acidului homopirocatecuic, homovanilic și m-hidroxifenilacetic.

Metode de determinare - vezi articolele dedicate descrierii pigmenților individuali sau grupelor de pigmenți.

Bibliografie: Vezi bibliogr, la art. Hemoglobina, Pigmenti respiratori, Pigmenti biliari, Mioglobina, Pigmenti.

N.V. Gulyaeva.

În condiții fiziologice, organismul (cu o greutate de 70 kg) va avea aproximativ 250-300 mg de bilirubină pe zi. 70-80% din această cantitate este hemoglobină din celulele roșii din sânge, care este distrusă în splină. Aproximativ 1% din globulele roșii sau 6-7 g de hemoglobină sunt distruse zilnic. Fiecare gram de hemoglobină produce aproximativ 35 mg de bilirubină. 10-20% din bilirubină este eliberată în timpul descompunerii anumitor hemoproteine care conțin hem (mioglobină, citocromi, catalază etc.). O mică parte de bilirubină este eliberată din măduva osoasă prin liza celulelor eritroide imature din măduva osoasă. Principalul produs al defalcării hemoproteinelor este bilirubina IX, a cărei durată de circulație în sânge este de 90 de minute. Bilirubina este un produs al etapelor succesive de conversie a hemoglobinei și, în mod normal, conținutul său în sânge nu depășește 2 mg% sau 20 µmol/l.

Tulburările metabolismului pigmentului pot apărea ca urmare a formării excesive a bilirubinei sau atunci când excreția acesteia printr-un șunt biliar este afectată. În ambele cazuri, conținutul de bilirubină din plasma sanguină crește peste 20,5 µmol/l, iar icterul apare în sclera și membranele mucoase. Când bilirubinemia depășește 34 µmol/l, apare icterul cutanat.

Datorită oxidării autocatalitice, fierul divalent al hemului este transformat în fier trivalent, iar hemul însuși este transformat în oxiporfirin și apoi în verdoglobină. Apoi fierul este scindat din verdoglobină și, sub acțiunea enzimei microzomale hemoxigenazei, verdoglobina este transformată în biliverdină, care, cu participarea biliverdin reductazei, este transformată în bilirubină. Bilirubina astfel formată se numește indirect sau gratuit, sau, mai clar, - neconjugată. Este insolubil în apă, dar foarte solubil în grăsimi și, prin urmare, toxic pentru creier. Acest lucru este valabil mai ales pentru forma de bilirubină care nu este asociată cu albumina. Odată ajunsă în ficat, bilirubina liberă, sub acțiunea enzimei glucuroniltransferazei, formează compuși perechi cu acidul glucuronic și este transformată în conjugat, drept, sau conectat bilirubină – monoglucuronid de bilirubină sau diglucuronid de bilirubină. Bilirubina directă este solubilă în apă și mai puțin toxică pentru neuronii creierului.

Diglucuronida de bilirubină intră în intestin cu bilă, unde, sub influența microflorei, acidul glucuronic este eliminat și se formează mezobilirubină și mezobilinogen sau urobilinogen. O parte din urobilinogen este absorbită din intestin și intră în ficat prin vena portă, unde este complet descompus. Urobilina poate intra în fluxul sanguin general, de unde intră în urină. O parte din mezobilinogenul găsit în colon este redus la stercobilinogen sub influența microflorei anaerobe. Acesta din urmă este excretat în fecale sub forma unei forme oxidate de stercobilină. Nu există nicio diferență fundamentală între stercobiline și urobiline. Prin urmare, în clinică se numesc corpi de urobilină și stercobilină. Astfel, bilirubina totală normală din sânge este de 8-20 µmol/l, sau 0,5-1,2 mg%, din care 75% este bilirubină neconjugată, 5% este bilirubină-monoglucuronid, 25% este bilirubină-diglucuronid. Până la 25 mg/l pe zi de corp urobilinogen se găsesc în urină.

Capacitatea țesutului hepatic de a forma compuși perechi de bilirubină cu acid glucuronic este foarte mare. Prin urmare, dacă formarea bilirubinei directe nu este afectată, dar există o tulburare a funcției exocrine a hepatocitelor, nivelul bilirubinemiei poate atinge valori de la 50 la 70 µmol/l. Când parenchimul hepatic este deteriorat, conținutul de bilirubină din plasmă crește la 500 µmol/l sau mai mult. În funcție de cauză (icter prehepatic, hepatic, subhepatic), bilirubina directă și indirectă poate crește în sânge (Tabelul 3).

Bilirubina este slab solubilă în apă și plasma sanguină. Formează un compus specific cu albumina la un centru de mare afinitate (bilirubina liberă sau indirectă) și este transportată la ficat. Bilirubina în exces se leagă de albumină, astfel încât este ușor scindată din proteină și difuzează în țesuturi. Unele antibiotice și alte medicamente care concurează cu bilirubina pentru centrul de mare afinitate al albuminei sunt capabile să înlocuiască bilirubina din complexul cu albumină.

Icter(icter) - un sindrom caracterizat prin colorarea icterică a pielii, mucoaselor, sclerei, urinei, lichidului din cavitățile corpului ca urmare a depunerii și conținutului de pigmenți biliari - bilirubină în tulburările de formare a bilei și excreția bilei.

În funcție de mecanismul de dezvoltare, se disting trei tipuri de icter:

Suprahepatic sau icter hemolitic asociat cu creșterea formării bilei din cauza defalcării crescute a globulelor roșii și a eritrocariocitelor care conțin hemoglobină (de exemplu, cu LA 12, anemie cu deficit de folat);

· hepatic, sau icter parenchimatos, cauzat de o încălcare a formării și secreției bilei de către hepatocite atunci când acestea sunt deteriorate, colestază și enzimopatii;

· Subhepatic, sau icter obstructiv, rezultat dintr-o obstrucție mecanică a secreției de bilă prin tractul biliar.

Icter prehepatic sau hemolitic. Etiologie: motivele ar trebui asociate cu creșterea hemolizei eritrocitelor și distrugerea eritrocariocitelor care conțin hemoglobină ca urmare a eritropoiezei ineficiente (hemoliza acută cauzată de diverși factori, anemie hemolitică congenitală și dobândită, anemie diseritropoetică etc.).

Patogeneza. Defalcarea crescută a eritrocitelor împotriva normei duce la creșterea formării bilirubinei libere, indirecte, neconjugate, care este toxică pentru sistemul nervos central și alte țesuturi, inclusiv. pentru celulele hematopoietice ale măduvei osoase (dezvoltarea leucocitozei, deplasarea formulei leucocitelor spre stânga). Deși ficatul are capacități semnificative de legare și producere a bilirubinei neconjugate, în condiții hemolitice este posibilă eșecul său funcțional sau chiar deteriorarea. Acest lucru duce la o scădere a capacității hepatocitelor de a lega bilirubina neconjugată și de a o transforma în continuare în bilirubină conjugată. Conținutul de bilirubină din bilă crește, ceea ce este un factor de risc pentru formarea pietrelor pigmentare.

Astfel, nu toată bilirubina liberă este transformată în bilirubină conjugată, deci o anumită parte a acesteia circulă în exces în sânge.

Aceasta se numește (1) hiperbilirubinemie (mai mult de 2 mg%) din cauza bilirubinei neconjugate.
(2) un număr de țesuturi corporale experimentează efectul toxic al bilirubinei directe (ficatul însuși, sistemul nervos central).
(3) din cauza hiperbilirubinemiei, se formează o cantitate în exces de pigmenți biliari în ficat și alte organe excretoare:

(a) glucuronide de bilirubină,
(b) urobilinogen,
(c) stercobilinogen (care duce la creșterea excreției),

(4) excreția cantităților în exces de corpuri de urobilină și stercobilină în fecale și urină.
(5) în același timp, există hipercolie - colorarea întunecată a scaunului.

Deci, cu icter hemolitic se observă următoarele:

Hiperbilirubinemie din cauza bilirubinei neconjugate; educație avansată urobilină; educație avansată stercobilină; hipercolic fecale; O absența colemiei, adică Nu există un conținut crescut de acizi biliari în sânge.

Icter hepatic sau parenchimatos. Etiologie . Cauzele icterului hepatic sunt variate

Infecții (virusuri ale hepatitei A, B, C, sepsis etc.);

· Intoxicație (intoxicare cu otravă de ciuperci, alcool, arsenic, droguri etc.). Se crede, de exemplu, că aproximativ 2% din toate cazurile de icter la pacienţii internaţi sunt de origine medicamentoasă;

Colestază (hepatită colestatică);
Defect genetic al enzimelor care asigură transportul bilirubinei neconjugate, enzime care asigură conjugarea bilirubinei - glucuronil transferază.
În bolile determinate genetic (de exemplu, sindromul Crigler-Nayyar, sindromul Dubin-Johnson etc.) există un defect enzimatic în reacția de conjugare și secreție. Nou-născuții pot prezenta deficiență enzimatică tranzitorie, manifestată prin hiperbilirubinemie.

Patogeneza. Când hepatocitele sunt deteriorate, așa cum se întâmplă în cazul hepatitei sau cu luarea de substanțe hepatotrope, procesele de biotransformare și secreție sunt perturbate în diferite grade, ceea ce se reflectă în raportul dintre bilirubina directă și indirectă. Cu toate acestea, bilirubina directă predomină de obicei. Odată cu leziuni inflamatorii și alte leziuni ale hepatocitelor, apar comunicări între căile biliare, sângele și vasele limfatice, prin care bila intră în sânge (și limfă) și parțial în căile biliare. La aceasta poate contribui și edemul spațiilor periportale. Hepatocitele umflate comprimă căile biliare, ceea ce creează dificultăți mecanice în fluxul de bilă. Metabolismul și funcțiile celulelor hepatice sunt perturbate, ceea ce este însoțit de următoarele simptome:

· Hiperbilirubinemie datorită bilirubinei conjugate și, într-o măsură mai mică, indirectă. Creșterea conținutului de bilirubină neconjugată se datorează scăderii activității glucuronil transferazei în hepatocitele deteriorate și formării afectate de glucuronide.

colalemie– prezența acizilor biliari în sânge.
O creștere a bilirubinei conjugate solubile în apă în sânge duce la apariția bilirubinei în urină - bilirubinurie, și o deficiență a bilei în lumenul intestinal - o scădere treptată a conținutului de urobilină în urină până la absența sa completă. Bilirubina directă este un compus solubil în apă. Prin urmare, este filtrat prin filtrul de rinichi și excretat prin urină
Cantitate redusă de stercobilină datorită formării sale limitate în intestine, unde o cantitate redusă de glucuronide de bilirubină intră în bilă.
Scăderea acizilor biliariîn chimul intestinal și fecale din cauza hipocoliei. Fluxul redus de bilă în intestine (hipocolie) provoacă tulburări digestive.
De o importanță mai mare sunt tulburările în metabolismul interstițial al proteinelor, grăsimilor și carbohidraților, precum și deficiența de vitamine. Funcția de protecție a ficatului scade, iar funcția de coagulare a sângelui are de suferit.

Tabelul 3

Mecanisme patogenetice ale hiperbilirubinemiei

Schimb de pigment

Metabolismul pigmentului se referă, de obicei, la toate procesele de formare, transformare și dezintegrare a pigmentului sanguin (hemoglobina), mai exact partea sa pigmentară neproteică și principalul derivat al acestui pigment - pigmentul biliar (bilirubina). În prezent, însă, se cunosc și alți pigmenți care, conform chimiei Compoziția este aparent similară cu Hb - acestea sunt Hb musculare, citocromi, enzima respiratorie Warburg și alți pigmenți încă foarte puțin studiati. Nu este încă posibilă separarea proceselor de formare, transformare și degradare a acestor pigmenți de procesele de schimb de Hb. Într-un sens mai larg, sub P..o. putem însemna procesele de formare, transformare și degradare a tuturor pigmenților din organism, adică atât pigmenții de mai sus, grupul Hb, cât și toți ceilalți pigmenți - melanina, lipocromii etc.

FIZIOLOGIA METABOLISMULUI BILIRUBINEI

Orez. 1.

Bn - bilirubină liberă (indirectă); B-G - bilirubină-glucuronid (bilirubină legată sau directă); Mbg - mezobilinogen (urobilinogen).

Cifrele romane indică etapele neutralizării

1. Stadiul I - captarea bilirubinei (B) de către celula hepatică după eliminarea albuminei;

2. Stadiul II - formarea unui complex solubil în apă bilirubină-diglucuronid (B-D);

3. Stadiul III - eliberarea bilirubinei (B-G) legate (directă) rezultată din celula hepatică în canaliculele biliare (conducte).

Metode de determinare a bilirubinei și a metaboliților săi

Determinarea bilirubinei în serul sanguin

În practica clinică, se folosesc diverse metode de determinare a bilirubinei și a fracțiilor sale în serul sanguin.

PROGRESUL DE DETERMINARE

Reactivii sunt introduși în 3 eprubete (2 probe experimentale și un martor) așa cum este indicat în tabel. Diazoreacția

Pentru a determina bilirubina legată, măsurarea se efectuează la 5-10 minute după adăugarea amestecului de diazo, deoarece în timpul repausului prelungit, bilirubina nelegată reacționează. Pentru a determina bilirubina totală, proba de dezvoltare a culorii este lăsată să stea timp de 20 de minute, după care se măsoară pe un fotometru. Culoarea nu se schimbă la continuarea stării în picioare. Măsurarea se efectuează la o lungime de undă de 500-560 nm (filtru verde) într-o cuvă cu o grosime a stratului de 0,5 cm împotriva apei. Proba martor se scade din valorile obținute prin măsurarea bilirubinei totale și conjugate. Calculul se face conform programului de calibrare. Se determină conținutul de bilirubină totală și legată. Metoda lui Jendrassik, Cleghorn și Grof este simplă, convenabilă în practică, nu implică utilizarea de reactivi puțini și este cea mai acceptabilă pentru laboratoarele practice imediat după prelevare pentru a evita oxidarea bilirubinei la lumină. Hemoliza serică reduce cantitatea de bilirubină proporțional cu prezența hemoglobinei. Prin urmare, serul sanguin nu trebuie hemolizat.

O serie de substanțe- hidrocortizon, androgeni, eritromicină, glucocorticoizi, fenobarbital, acid ascorbic - provoacă interferențe.

Construirea graficului de calibrare folosind metoda Jendrassik.

Metoda I-- Shelonga-Wendes folosind proprietățile stabilizatoare ale proteinei serice. Soluție stoc de bilirubină:într-un balon de 50 ml, se dizolvă 40 mg de bilirubină în 30--35 ml de soluție de carbonat de sodiu 0,1 mol/l Na 2 CO 3. Agitați bine, evitând formarea de bule. Se ajustează la 50 ml cu soluție de Na2CO3 0,1 mol/l și se agită de mai multe ori. Soluția este stabilă doar timp de 10 minute de la începutul preparării. Ulterior, bilirubina este oxidată. Soluție de lucru a bilirubinei: la 13,9 ml de ser proaspăt nehemolizat al unei persoane sănătoase se adaugă 2 ml de soluție de bilirubină bazică proaspăt preparată și 0,1 ml de soluție de acid acetic 4 mol/l. Amesteca bine. Acest lucru eliberează bule de dioxid de carbon. Soluția de lucru este stabilă timp de câteva zile. Această soluție conține exact 100 mg/L, sau 171 µmol/L, mai multă bilirubină decât serul luat pentru prepararea soluției. Pentru a exclude din calcule cantitatea de bilirubină conținută în acest ser, atunci când se măsoară pe un fotometru, valorile de extincție ale diluțiilor corespunzătoare ale lichidului de compensare sunt scăzute din valorile de extincție ale probelor de calibrare. Pentru a pregăti lichidul de compensare, se amestecă 13,9 ml din același ser care a fost utilizat pentru prepararea soluției de calibrare a bilirubinei, 2 ml dintr-o soluție de carbonat de sodiu 0,1 mol/L și 0,1 ml dintr-o soluție de acid acetic 4 mol/L. Pentru a construi o curbă de calibrare, se prepară o serie de diluții cu conținut diferit de bilirubină. La diluțiile rezultate se adaugă 1,75 ml de reactiv de cafeină și 0,25 ml de amestec diazoic. Dacă apare tulbureală, puteți adăuga 3 picături dintr-o soluție de hidroxid de sodiu 30%. Măsurarea se efectuează în aceleași condiții ca la probele experimentale, după 20 de minute. Din lichidul de compensare se prepară diluții similare cu cele de calibrare (așa cum este indicat mai jos), apoi sunt procesate în același mod ca probele de calibrare.

Masa. Determinarea bilirubinei legate

A doua metodă este de a construi un grafic de calibrare utilizând un set gata preparat de reactivi (De exemplu, setul de bilirubină este un standard de la Lachem, care include bilirubină liofilizată (concentrația exactă de bilirubină este afișată pe eticheta flaconului); și albumină liofilizată.)